September 3, 2015
July 4, 2014
CROMATOGRAFÍA DE AZÚCARES
1.1 GENERAL
Determinar los azúcares mediante la cromatografía ascendente en el papel filtro.
1.2 ESPECÍFICO
- Identificar los azúcares que están presentes en la muestra problema.
- Conocer las partes que conforman la cromatografía.
- Calcular el factor de retención (Rf) de las muestras de azúcar.
2.MARCO TEÓRICO
En esta cromatografía se utiliza el fenómeno de partición en donde la fase estacionaria se halla sobre un soporte activo (el papel) que en realidad forma parte de la fase estacionaria que es el agua. Las fases móvil y estacionaria estarán en contacto en una gran interfase, lo que permite una rápida obtención de una distribución de equilibrio del soluto entre ellas. Si la muestra problema está formada por más de un soluto, éstos se separan por sus diferentes coeficientes de partición. La realización de la cromatografía en papel implica la siembra de la muestra problema en un trozo de papel de buena calidad, en general para cromatografía analítica, que luego se introducirá en una cuba descienda por capilaridad y gravedad (técnica descendente). La fase estacionaria es un complejo de desarrollo de modo que el solvente ( fase móvil) ascienda por capilaridad (técnica ascendente) o celulosa - agua que tiene un poder diferente que el del agua pura en esta cromatografía es muy importante efectuar el cálculo del Rf para cada componente de la mezcla por separado, que es característico de cada compuesto en condicio
nes constantes: soporte, temperatura, solventes, altura de desarrollo.
Distancia recorrida por el compuesto desde el origen o punto de siembra Rf = Distancia recorrida por el solvente desde el origen o punto de siembra
El Rf toma valores entre 0 y 1 y puede ser usado para la identificación de los componentes de
una muestra, siempre y cuando se trate de sistemas cromatográficos idénticos. Para identificar un azúcar desconocido se cromatografía junto con patrones ya conocidos y se comparan los valores RF utilizando diferentes mezclas líquidas. El azúcar problema corresponde al patrón cuyos valores de Rf sean idénticos en todos los casos. Si los compuestos de la mezcla son coloreados, las manchas son visibles directamente. De lo contrario habrá que revelarlas.
Luz UV: si los compuestos absorben esta radiación las manchas se verán con fluorescencia.
Tabla de Resultados
3.PROCEDIMIENTO
4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
4.1. RESULTADO PRÁCTICO
Cromatograma obtenido en la práctica de laboratorio.
Tabla de Resultados
A continuación los estándares utilizados para la practica de cromatografia incluyendo nuestra muestra problema
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La muestra de sacarosa se mostró en el revelado ya que coincide con la mancha de la muestra, por tanto se podría decir que si forma parte de la muestra problema.
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La muestra maltosa se presentó en el revelado, esta no se encuentra a la misma altura de la mancha problema por lo que la muestra problema no posee maltosa.
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En la presente muestra desconocida ya en el revelado presenta manchas dudosas, la que más coincide es con la mancha de glucosa, pero en realidad no son muy claras y no coinciden en su totalidad por lo que no podemos concluir con firmeza, deberá utilizarse otro método que sea más específico para su identificación.
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La muestra de fructosa ya en el revelado, está casi al nivel de la muestra problema, por lo que decimos que fructosa probablemente está presente en la muestra desconocida.
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La muestra de glucosa ya en el revelado se presentó como una mancha de tono más oscuro pero casi esta al nivel de la muestra problema por lo que se pretende que en la muestra desconocida este presente glucosa.
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4.2 DISCUSIÓN
- En el revelado de la cromatografía de azúcares se puede observar que posiblemente la muestra desconocida no tiene maltosa pero esto no es muy confiable ya que la cromatografía no tiene resultados buenos para lo cual se debería repetir la cromatografía hasta obtener resultados más exactos.
- También podemos observar que hay tres azúcares que podrían ser o no parte de la muestra problema ya que están casi al mismo nivel de la mancha de la muestra desconocida estos son (fructosa,sacarosa y glucosa).
4.2. Resultado del cálculo
para la glucosa tenemos:
fr=x/y
fr= 3.9/10
fr=0.39
para la fructosa tenemos:
fr=x/y
fr= 4,2/10
fr=0.42
Para la Sacarosa tenemos:
fr=x/y
fr= 3.7/10
fr=0.37
para la maltosa tenemos:
fr= x/y
fr= 2,8/10
fr=0.28
para la muestra problema tenemos:
fr= x/y
fr= 4/10
fr=0.4
CONCLUSIONES
- Determinamos los azúcares presentes en la muestra mediante la cromatografía en papel, los cuales, según el cromatograma fueron Fructosa ,Glucosa y sacarosa
- Conocimos como se encuentra estructurado el proceso de cromatografía que es la interacción entre la fase móvil (mezcla de solventes), fase estacionaria (papel cromatográfico) y la estructura del compuesto (muestra y azúcares estándar)
- Realizando los cálculos correspondientes se determinó los siguientes valores :
FRUCTOSA: fr=0.42
SACAROSA :fr=0.37
MALTOSA : fr=0.28
GLUCOSA: fR=0.39
MUESTRA PROBLEMA:fr=0.4
June 24, 2014
PRUEBA DE BARFOED
IDENTIFICACIÓN DE AZÚCARES MEDIANTE LA REACCIÓN DE BARFOED
1.OBJETIVOS
1.1 GENERAL
Identificar azúcares haciendo uso de la reacción de barfoed.
1.2 ESPECÍFICO
- Indicar las características que presenta la reacción de barfoed.
- Deducir que muestras utilizadas reaccionan más rápido con este reactivo
2. MARCO TEÓRICO
2.1 INTRODUCCIÓN
La Prueba de Barfoed es un ensayo químico utilizado para detectar monosacáridos. Se basa en la reducción de cobre (II) (En forma de acetato) a cobre (I) (En forma de óxido), el cual forma un precipitado color rojo ladrillo.
RCOH + 2Cu+2 + 2H2O → RCOOH + Cu2O↓ + 4H+
Los disacáridos también pueden reaccionar, pero en forma más lenta. El grupo aldehído el monosacárido que se encuentra en forma de hemiacetal se oxida a su ácido carboxílico correspondiente. Muchas sustancias, entre ellas el cloruro de sodio, pueden interferir en la prueba.
Esta prueba fue descrita por primera vez por el químico danés Christen Thomsen Barfoed y se utiliza principalmente en botánica. La prueba es similar a la prueba de Fehling.
2.1.1 COMPOSICIÓN
El reactivo de Barfoed se compone de una solución de 0.33 molar de acetato de cobre neutro en una solución de 1% de ácido acético. No es recomendable guardar el reactivo, sino prepararlo previamente a su uso.
3.PROCEDIMIENTO
4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
4.1. RESULTADO PRÁCTICO
GLUCOSA
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MALTOSA
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REACTIVO
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+(precipitado color rojo, es un monosacárido,precipitó antes de los 5 minutos)
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- (no precipitó durante los 5 minutos, ya que es un disacárido y este puede precipitar en el intervalo de de 5 a 30 minutos). Si existe precipitado pero es un disacárido y precipitó en un mayor tiempo cuyo precipitado es de color rojo que es el Cu2O
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Barfoed
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4.2 DISCUSIÓN
En la muestra de glucosa al colocar el reactivo de barfoed y ponerlo a baño maría se pudo observar que en un tiempo menor a 5 minutos se produjo un precipitado de color rojo, mientras que la maltosa al hacer el mismo procedimiento y en el mismo tiempo no se produjo precipitado , esto se debe a que el reactivo de barfoed sirve para determinar si el azúcar es reductor y tambien si es monosacárido o disacárido como la glucosa reaccionó antes de los 5 min se determina que es un monosacárido mientras que la maltosa no lo hizo por tanto se dice que es un disacárido, los disacáridos precipitan en un intervalo de 5 a 30 minutos ya reacciona de una forma más lenta. El grupo aldehído del monosacárido que se encuentra en forma de hemiacetal se oxida a su ácido carboxílico correspondiente.
5. CONCLUSIONES
- Las característica que presenta la reacción de Barfoed son: que se forma un precipitado de color rojo óxido cuproso (Cu2O) cuando es un monosacárido reacciona de 0 a 5 minutos y si es disacárido de 5 a 30 minutos y que es una reaccion de oxidacion.
- La glucosa reacciona más rápido por ser un monosacárido y la maltosa en un tiempo más largo por ser un disacárido.
6. BIBLIOGRAFÍA
PRUEBA DE BARFOED
HIDRÓLISIS DE LA SACAROSA
PRUEBA DE HIDRÓLISIS DE LA SACAROSA
1.OBJETIVO
1.1 GENERAL
Ensayar lo que le sucede a la sacarosa luego del hidrolizado
1.2 ESPECÍFICO
- Observar el resultado de la hidrólisis sobre la sacarosa con el reactivo de Fehling
- Comparar lo que sucede en la hidrólisis de la sacarosa con el reactivo de Seliwanoff .
2.MARCO TEÓRICO
La sacarosa que es dextrógira, por la acción de los ácidos se hidroliza para dar cantidades equimoleculares de D(+) Glucosa y D(-) Fructosa. Como la rotación específica de la D(-) Fructosa es mayor que la de la D(+) Glucosa, el curso de la hidrólisis se puede seguir, observando la inversión en el poder rotatorio de la solución. El ácido clorhídrico permite que el enlace glucosídico entre los dos monómeros que forman la sacarosa se hidroliza. Al estar en forma monomérica, las moléculas sufren mutarrotación.
En presencia de ClH (ácido clorhídrico) y en caliente, la sacarosa se hidroliza, es decir, incorpora una molécula de agua y se descompone en los monosacáridos que la forman, glucosa y fructosa, que sí son reductores. La prueba para verificar la hidrólisis se realiza con el licor de Fehling y, si el resultado es positivo, aparecerá un precipitado rojo. Si el resultado es negativo, la hidrólisis no se ha realizado correctamente y si en el resultado final aparece una coloración verde en el tubo de ensayo se debe a una hidrólisis parcial de la sacarosa.
Es el resultado de una reacción química, se produce por la descomposición química de de la sacarosa (azúcar común) o de dos subproductos, (Glucosa y fructosa).
3. PROCEDIMIENTO
4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
4.1 RESULTADO PRÁCTICO
4.2 DISCUSIÓN
PRUEBA DE FEHLING PARA LA HIDRÓLISIS DE LA SACAROSA
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PRUEBA DE SELIWANOFF PARA LA HIDRÓLISIS DE LA SACAROSA
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La sacarosa es un disacárido que no posee carbonos anoméricos libres por lo que carece de poder reductor y la reacción de fehling es negativa. Sin embargo la sacarosa se hidroliza, es decir incorpora una molécula de agua y se descompone en los monosacáridos que la forman, glucosa y fructosa, que si son reductores. La prueba de que se ha verificado la hidrólisis se realiza con Fehling si el resultado es positivo aparecerá un precipitado rojo.
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Esta prueba da negativo por el carácter básico de la solución de HNO3 y Na2CO3 razón por la cual mezclada con seliwanoff de carácter ácido ambas se neutralizan ; por lo cual se va a agregar 1 gota más de acido con esto pudimos observar que al variar de solución neutra a ácida se puede dar el reconocimiento del color característico rojo.
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5. CONCLUSIONES
- Prueba de Fehling para hidrólisis de la sacarosa da positivo con un precipitado color ladrillo
- Prueba de Seliwanoff para hidrólisis de la sacarosa da negativo por el carácter básico de la solución de HNO3 y Na2CO3 razón por la cual no cambio de color.
6. BIBLIOGRAFÍA
PRUEBA DE HIDRÓLISIS DE LA SACAROSA
REACCIÓN DE YODO (LUGOL)
IDENTIFICACIÓN DE LA REACCIÓN DE YODO (LUGOL)
1. OBJETIVO
1.1 GENERAL
Ensayar la reacción del yodo (lugol).
1.2 ESPECÍFICO
- Indicar las características que presenta la reacción del yodo.
- Comparar las reacciones de lugol con el almidón y lugol con agua.
2.1 INTRODUCCIÓN
El lugol o disolución de Lugol es una disolución de yodo molecular I2 y yoduro potásico KI en agua destilada. Se preparó por primera vez en 1829 y recibe su nombre en honor al médico francés J.G.A. Lugol.
Este producto se emplea frecuentemente como desinfectante y antiséptico, para la desinfección de agua en emergencias y como un reactivo para la prueba del yodo en análisis médicos y de laboratorio.
También se ha usado para cubrir deficiencias de yodo; sin embargo, se prefiere el uso de yoduro potásico puro debido a la ausencia de yodo diatómico, forma molecular cuyo consumo puede resultar tóxico.
Fórmula:
Consiste en 20 gramos de yodo metálico y 40 gramos de yoduro potásico, disueltos en 1 litro de agua destilada. El yoduro potásico facilita la disolución del yodo diatómico, debido a la formación de iones triyoduro I3-.
No debe confundirse el lugol con la tintura de yodo, que consiste en yodo diatómico y sales de yodo disueltos en una mezcla de agua y alcohol etílico (etanol). La disolución de Lugol no contiene alcohol.
Aplicaciones
Aplicaciones
- En microbiología se emplea en la tinción de Gram para retener el colorante cristal violeta. El I2 entra en las células y forma con el colorante cristal violeta un complejo insoluble en agua.
- Se utiliza esta solución como indicador en la prueba del yodo, que sirve para identificar polisacáridos como los almidones, glucógeno y ciertas dextrinas, formando un complejo de inclusión termolábil que se caracteriza por presentar distintos colores según las ramificaciones que presente la molécula de polisacárido. El lugol no reacciona con azúcares simples como la glucosa o la fructosa.
- Se puede usar como un colorante para células, haciendo el núcleo celular más visible en microscopías y para preservar muestras de fitoplancton.
- En una colposcopia, la disolución de Lugol se utiliza en la prueba de Schiller en busca de tejido vaginal canceroso.
- Se puede usar la disolución de Lugol para observar la forma en la que la membrana celular hace ósmosis, fagocitosis y difusión.
3.PROCEDIMIENTO
4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
4.1. RESULTADO PRÁCTICO
ALMIDÓN
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AGUA
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REACTIVO
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Color Violeta
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Amarillento(color del yodo)
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Rx de Yodo (Lugol)
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4.2 DISCUSIÓN
5. CONCLUSIONES
- La característica que presenta la reacción de yodo o lugol es que sirve para determinar almidón ,al reaccionar el almidón con el lugol forma un color violeta debido a que el almidón está constituido por amilosa que al reaccionar con el yodo da un color azul y amilopectina da un color rojo es por eso que al combinarse dan un color violeta, y es una reacción de coloración.
- En el caso de la Investigación de polisacáridos (Almidón), la coloración fue producida por el Lugol y esto se debió a que el yodo se introduce entre las espiras de la molécula de almidón.La prueba del yodo es una reacción química usada para determinar la presencia de almidón u otros polisacáridos.Esta reacción es el resultado de la formación de cadenas de poliyoduro a partir de la reacción del almidón con el yodo,mientras que el agua con el yodo (lugol), solo toma la coloración del yodo que es amarillento. ya que no reacciona.
- Cambia de color porque el almidón estructuralmente es amilosa y amilopectina, la primera al reaccionar con I2 va a dar un color azul, mientras que la amilopectina al reaccionar con el I2 va dar un color rojo, por lo tanto la mezcla de los dos nos va a dar la tonalidad violeta.
6. BIBLIOGRAFÍA
PRUEBA DEL YODO
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